RNX-Plus یک محلول گوانیدین/فنول است که برای استخراج RNA کل از نمونه هموژنیزه شده استفاده می شود. در روش جداسازی RNA با استفاده از نمک گوانیدین، DNA و پروتئین به طور همزمان در فاز فنول رسوب می کنند. فاز آبی حاوی RNA با کیفیت بالا و انواع مختلف RNA ژنومی است.
مراحل اصلی جداسازی RNA با RNX-Plus
- همگن سازی نمونه: این مرحله برای آزادسازی RNA از سلول ها ضروری است. همگن سازی ناکافی به طور قابل توجهی بازده RNA را کاهش می دهد.
- استخراج RNA: RNX-Plus به لیز سلول ها، دناتوره شدن پروتئین ها و جداسازی RNA از DNA و سایر اجزای سلولی کمک می کند.
- RNA: RNA با استفاده از الکل ایزوپروپانل از فاز آبی رسوب می کند.
- شستشو و خالص سازی RNA: RNA با استفاده از اتانول شسته می شود تا ناخالصی ها از بین بروند.
- حل شدن RNA: RNA در نهایت در آب بدون RNase حل می شود.
مزایای استفاده از آن
- بازده بالا RNA با کیفیت
- استخراج RNA از طیف گسترده ای از نمونه ها
- روش نسبتاً ساده و سریع
- سازگاری با روش های مختلف پایین دستی
مراحلی که هنگام کار باید رعایت کرد
- RNX-Plus حاوی گوانیدین تیوسیانات (یک ماده تحریک کننده) و فنول (سم) است.
- هنگام کار با این محلول باید از دستکش استفاده کرد و از تماس با چشم، پوست و لباس خودداری کرد.
- از تنفس بخارات آن خودداری کنید.
کاربردهای RNX-Plus
- مطالعات بیان ژن
- تجزیه و تحلیل رونوشت
- تجزیه و تحلیل miRNA
- مطالعات توالی RNA
Reviews
There are no reviews yet.