مستر میکس ریل تایم (Real-time PCR Master Mix) مخلوطی از مواد لازم برای انجام واکنش پلیمرز زنجیرهای کمی در زمان واقعی (qPCR) است.
این مخلوط شامل موارد زیر میشود:
- آنزیم Taq DNA پلیمراز: این آنزیم مسئول سنتز DNA جدید بر اساس رشته DNA است.
- دنا پرایمر: پرایمرها رشتههای کوتاهی از DNA هستند که به آنزیم Taq DNA پلیمراز محل اتصال به DNA را نشان میدهند.
- dNTPها: dNTPها نوکلئوتیدهای تری فسفات هستند که واحدهای ساختاری DNA را تشکیل میدهند.
- بوفر: بافر محیط واکنش را از نظر pH و غلظت نمک در شرایط مناسب نگه میدارد.
- مگنزیم کلرید: منیزیم برای فعالیت آنزیم Taq DNA پلیمراز ضروری است.
- رنگ فلورسنت: رنگ فلورسنت مانند SYBR Green I برای اندازهگیری مقدار DNA در طول واکنش qPCR استفاده میشود.
مستر میکسهای ریل تایم در دو نوع اصلی یک مرحلهای (One-step) و دو مرحلهای (Two-step) موجود هستند:
- مستر میکسهای ریل تایم یک مرحلهای: این نوع مستر میکس شامل آنزیم رونوشت بردار معکوس (Reverse Transcriptase) نیز میشود که RNA را به cDNA تبدیل میکند. cDNA میتواند توسط آنزیم Taq DNA پلیمراز تکثیر شود.
- مستر میکسهای ریل تایم دو مرحلهای: در این نوع مستر میکس، تبدیل RNA به cDNA در مرحله جداگانهای قبل از qPCR انجام میشود.
مزایای استفاده از مستر میکس ریل تایم عبارتند از:
- سهولت استفاده: مستر میکس ریل تایم شامل تمام مواد لازم برای انجام qPCR در یک ویال است، که این امر باعث سهولت و کارایی بیشتر این روش میشود.
- دقت: مستر میکسهای ریل تایم به گونهای طراحی شدهاند که نتایج دقیق و قابل اعتمادی را ارائه دهند.
- حساسیت: مستر میکسهای ریل تایم میتوانند مقادیر بسیار کمی از DNA را تشخیص دهند.
- سرعت: qPCR با استفاده از مستر میکس ریل تایم میتواند به سرعت انجام شود.
کاربردهای مستر میکس ریل تایم عبارتند از:
- تشخیص بیماریهای عفونی: qPCR میتواند برای تشخیص وجود DNA یا RNA ویروسها، باکتریها و سایر عوامل بیماریزا استفاده شود.
- کوانتیتاِت بیان ژن: qPCR میتواند برای اندازهگیری میزان بیان ژن در سلولها یا بافتها استفاده شود.
- تشخیص جهش: qPCR میتواند برای شناسایی جهشها در DNA استفاده شود.
- تحقیقات پزشکی قانونی: qPCR میتواند برای شناسایی DNA در صحنه جرم استفاده شود.
Reviews
There are no reviews yet.