DMEM/F12 (Glutamax)

DMEM/F12 (Glutamax) یکی از رایج‌ترین محیط‌های کشت سلولی برای ویروس شناسی تشخیصی است. از زمان اولین گزارشات محیط Eagle، مطالعات گسترده‌ای برای تعیین مواد مغذی مورد نیاز سلول‌های مختلف انجام شد. اغلب مواد مغذی ضروری شناسایی شدند و مطالعات مختلفی بر احتیاجات انواع رده‌های سلولی متمرکز شد.

 استفاده از محیط کشت گلوتامکس برای تشخیص آزمایشگاهی

جداسازی ویروس‌های انسانی از نمونه‌های بالینی با استفاده از کشت سلولی ضروری است زیرا این تنها تکنیکی است که قادر به انجام این کار است. ارائه یک ایزوله زنده که می‌تواند برای آزمایش حساسیت ضد ویروسی استفاده شود. یک مزیت این است که برخلاف اکثر آنتی ژن‌ها و روش‌های تشخیص اسید نوکلئیک، کشت ویروسی امکان تشخیص چندین ویروس را فراهم می‌کند. محصولات محیط کشت سلولی DMEM/F12 (Glutamax) برای استفاده این کار عالی هستند.

اجزای اصلی DMEM/F12 (Glutamax)

• DMEM: محیطی غنی از گلوکز است و برای کشت سلول‌هایی که نیاز به گلوکز بالا دارند، مانند سلول‌های سرطانی، مناسب است.
• F-12: محیطی است که حاوی غلظت بالاتری از ویتامین‌ها، اسیدهای آمینه و مواد معدنی نسبت به DMEM است و برای کشت سلول‌هایی که نیاز به محیطی غنی‌تر دارند، مناسب است.
• GlutaMAX: یک فرم پایدار از گلوتامین است که یک اسید آمینه ضروری برای رشد سلول‌ها است.

محیط کشت گلوتامکس و کاربرد آن

در این راستا محیط های زیادی تولید شده و در دسترس قرار دارد. یکی از اولین محیط ها در این مورد، که در ابتدا برای بررسی نیازهای هورمونی سلول ها در کشت توسعه یافت، مخلوطی از محیط کشت DMEM و Ham’s F12 بود که به عنوان محیط کشت DMEM Ham’s F12 (DMEM/F-12) شناخته شده است. محیط کشت DMEM/F-12 یک محیط کشت پایه بسیار رایج برای رشد انواع مختلف سلول های پستانداران است.

• کشت سلول‌های آدرنال: این محیط برای کشت سلول‌های آدرنال که هورمون‌های استروئیدی تولید می‌کنند، بسیار مناسب است.
• کشت سلول‌های عصبی: DMEM/F12 (Glutamax) به عنوان یک محیط پایه برای کشت سلول‌های عصبی اولیه و سلول‌های بنیادی عصبی استفاده می‌شود.
• کشت سلول‌های اپیتلیال: این محیط برای کشت سلول‌های اپیتلیال، مانند سلول‌های روده و سلول‌های کلیه، مناسب است.
• کشت سلول‌های اندوتلیال: DMEM/F12 (Glutamax) برای کشت سلول‌های اندوتلیال که دیواره داخلی رگ‌ها را تشکیل می‌دهند، استفاده می‌شود.
• کشت سلول‌های فیبروبلاست: این محیط برای کشت سلول‌های فیبروبلاست که پروتئین‌های ساختاری تولید می‌کنند، مناسب است.

مزایای DMEM/F12 (Glutamax)

• رشد بهینه سلول‌ها: این محیط کشت حاوی طیف وسیعی از آمینو اسیدها، ویتامین‌ها، گلوکز و سایر مواد مغذی ضروری برای رشد و تکثیر سلول‌ها است.
• حفظ pH فیزیولوژیک: وجود بافر HEPES در این محیط، به حفظ pH مناسب برای رشد سلول‌ها کمک می‌کند.
• افزایش طول عمر سلول‌ها: Glutamax موجود در این محیط، یک فرم پایدار گلوتامین است که به آرامی هیدرولیز شده و در نتیجه طول عمر سلول‌ها را افزایش می‌دهد.
• سازگاری با انواع سلول‌ها: DMEM/F12 (Glutamax) برای کشت انواع مختلف سلول‌های پستانداران، از جمله فیبروبلاست‌ها، سلول‌های اپیتلیال، سلول‌های عصبی و سلول‌های سرطانی مناسب است.
• تکرارپذیری بالا: استفاده از این محیط کشت، نتایج قابل تکرار و قابل اعتمادی را در آزمایشات مختلف فراهم می‌کند.

محیط کشت DMEM/F12 (Glutamax) برای چه سلول‌هایی مناسب است؟

این محیط کشت DMEM/F12 (Glutamax) برای سلول‌هایی مانند MDCK، سلول‌های گلیال، فیبروبلاست‌ها، سلول‌های اندوتلیال انسان و همچنین فیبروبلاست‌های موش به خوبی در محیط کشت DMEM/F12 رشد می‌کنند. این محصول (BI-1012) یک مخلوط از محیط DMEM و محیط مغذی F-21 همراه با ال-گلوتامین، بیکربنات سدیم و فنل رد است است. برای حفظ بهتر pH فیزیولوژیک در غلظت‌های مختلف دی اکسید کربن، محلول HEPES (هیدروکسیل-پیپرازین اتان سولفونیک اسید)، بعنوان یک عامل بافری شیمیایی زوئیترونیک به محیط اضافه شده است.

نکته: برای به دست آوردن بهترین نتیجه، باید DMEM/F12 (Glutamax) را با سایر مکمل‌ها و فاکتورهای رشد مناسب برای نوع سلول مورد نظر تکمیل کرد.

در انتخاب محیط کشت مناسب، علاوه بر نوع سلول، فاکتورهایی مانند نوع آزمایش، مرحله رشد سلول و نیازهای خاص سلول نیز باید در نظر گرفته شوند.