بافر TBS 10X یا Tris-Buffered Saline (TBS) یک بافر محلول آبی است که به طور معمول در بیوشیمی و زیست‌شناسی مولکولی برای حفظ pH فیزیولوژیکی سلول‌ها و بافت‌ها استفاده می‌شود. این محلول ایزوتونیک با بدن انسان است، به این معنی که فشار اسمزی آن با مایعات موجود در سلول‌ها یکسان است.

کاربردهای بافر TBS 10X

بافر شستشو: TBS 10X به طور گسترده به عنوان یک بافر شستشو در طیف وسیعی از تکنیک‌های آزمایشگاهی از جمله Western blot، ELISA و ایمونوهیستوشیمی استفاده می‌شود. این محلول به حذف مواد اضافی از غشاها یا صفحات ELISA بدون از بین بردن آنتی‌بادی‌ها یا سایر مولکول‌های هدف کمک می‌کند.
رقیق کننده: TBS 10X را می‌توان برای رقیق کردن آنتی‌بادی‌ها، نمونه‌ها و سایر معرفات در آزمایش‌های ایمونولوژیکی استفاده کرد.
حفظ سلول: TBS 10X را می‌توان برای حفظ سلول‌ها و بافت‌ها در حین آماده‌سازی نمونه استفاده کرد.

مزایای بافر TBS 10X

ایزوتونیک: بافر TBS 10X ایزوتونیک با سلول های یوکاریوتی است، به این معنی که فشار اسمزی آن با فشار اسمزی داخل سلول ها یکسان است. این امر از لیز سلول ها در حین آزمایشات جلوگیری می کند.
غیر سمی: TBS 10X برای سلول ها سمی نیست، بنابراین می توان از آن برای شستشوی سلول ها بدون آسیب رساندن به آنها استفاده کرد.
قابلیت تنظیم pH: pH بافر TBS 10X را می توان با افزودن اسید یا باز تنظیم کرد. این امر آن را برای طیف گسترده ای از کاربردها مناسب می کند.
حفظ فعالیت آنتی بادی: TBS 10X فعالیت آنتی بادی را حفظ می کند، بنابراین می توان از آن برای رقیق کردن آنتی بادی ها برای ایمونوآسای ها استفاده کرد.
پایداری: TBS 10X در دمای اتاق پایدار است، بنابراین می توان آن را برای مدت طولانی بدون افت کیفیت ذخیره کرد.

آزمایشگاه هایی که از بافر TBS 10X استفاده می کنند:

بیوشیمی: TBS 10X به طور گسترده در آزمایشگاه های بیوشیمی برای مطالعه پروتئین ها، آنزیم ها و سایر مولکول های زیستی استفاده می شود.
زیست شناسی سلولی: TBS 10X در آزمایشگاه های زیست شناسی سلولی برای مطالعه ساختار و عملکرد سلول ها استفاده می شود.
ایمونولوژی: TBS 10X در آزمایشگاه های ایمونولوژی برای مطالعه سیستم ایمنی استفاده می شود.
داروشناسی: TBS 10X در آزمایشگاه های داروشناسی برای مطالعه اثرات داروها بر سلول ها استفاده می شود.

دو روش برای تهیه بافر TBS 10X وجود دارد:

روش 1: استفاده از مواد اولیه

مواد لازم:

24.2 گرم تریس پایه
87.6 گرم کلرید سدیم
آب مقطر تا 1 لیتر

دستورالعمل ها:

24.2 گرم تریس پایه را در 500 میلی لیتر آب مقطر حل کنید.
با استفاده از همزن مغناطیسی، محلول را هم بزنید تا زمانی که تریس به طور کامل حل شود.
87.6 گرم کلرید سدیم را اضافه کنید و هم بزنید تا حل شود.
pH محلول را با استفاده از pH متر بررسی کنید. pH باید 7.6 باشد. اگر pH خیلی کم است، از HCl 1M برای تنظیم آن به آرامی استفاده کنید. اگر pH خیلی زیاد است، از NaOH 1M برای تنظیم آن به آرامی استفاده کنید.
حجم نهایی را با اضافه کردن آب مقطر به 1 لیتر برسانید.
محلول را به خوبی مخلوط کرده و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.

روش 2: استفاده از قرص یا کیسه بافر TBS 10X

این روش ساده تر و سریع تر است، اما ممکن است کمی گران تر باشد.

مواد لازم:

قرص یا کیسه بافر TBS 10X
آب مقطر

دستورالعمل ها:

1 قرص یا کیسه بافر TBS 10X را در 100 میلی لیتر آب مقطر حل کنید.
محلول را به خوبی مخلوط کرده و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.

نکات لازم هنگام استفاده از آن

از مواد شیمیایی با کیفیت بالا استفاده کنید.
از آب مقطر تازه تهیه شده استفاده کنید.
قبل از استفاده، pH محلول را بررسی کنید.
محلول را در یخچال نگهداری کنید.
بافر TBS 10X را می توان تا 6 ماه در یخچال نگهداری کرد.
TBS 10X را می‌توان در دمای اتاق برای چند ماه یا در 4 درجه سانتی‌گراد برای مدت طولانی‌تر نگهداری کرد.
قبل از استفاده، TBS 10X را به دمای اتاق برسانید.
برای تهیه TBS 1X، 100 میلی‌لیتر TBS 10X را با 900 میلی‌لیتر آب دیونیزه رقیق کنید.

نکات ایمنی

هنگام کار با مواد شیمیایی، همیشه از دستکش، عینک و روپوش آزمایشگاهی استفاده کنید.
از بلعیدن یا تماس بافر TBS با پوست یا چشم خودداری کنید.
در صورت تماس، با مقدار زیادی آب شستشو دهید.
بافر TBS را مطابق با دستورالعمل های محلی دفع کنید.

توجه: لیست مختصر از مزایا و کاربردهای بافر TBS 10X را برای شما شرح دادیم. TBS 10X یک ابزار ارزشمند در بسیاری از زمینه های مختلف تحقیقات بیولوژیکی است.