مطالب آموزشی

مواد پرکاربرد آزمایشگاهی

مواد پرکاربرد آزمایشگاهی

مواد پرکاربرد آزمایشگاهی در آزمایشگاه ‌ها، مواد پرکاربرد زیادی مورد استفاده قرار می‌گیرند که برخی از مهم‌ترین آن‌ها شامل حلال‌ها (مانند آب مقطر، اتانول، استون و کلروفرم)، اسیدها و بازها (مانند اسید کلریدریک، اسید سولفوریک، سود سوزآور و آمونیاک)، بافرها (مانند بافر فسفات PBS و تریس)، نمک‌ها (مانند سدیم کلرید و پتاسیم کلرید)، شاخص‌های pH (مانند فنول فتالئین و بروموتیمول بلو)، آنزیم‌ها (مانند Taq پلیمراز و اندونوکلئازها)، کیت‌های استخراج DNA/RNA و محیط‌های کشت میکروبی (مانند LB براث و آگار) هستند. این مواد در زمینه‌های مختلفی از جمله بیوشیمی، میکروبیولوژی، ژنتیک و شیمی تجزیه کاربرد دارند.

فهرست مطالب

معرفی مواد شیمیایی پرکاربرد در آزمایشگاه

مواد شیمیایی پرکاربرد در آزمایشگاه (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی) شامل ترکیباتی مانند اسیدها (HCl، H₂SO₄، HNO₃)، بازها (NaOH، KOH)، حلال‌های آلی (اتانول، استون، متانول) و مواد بافر (بافر فسفات، تریس) هستند که در واکنش‌های شیمیایی، تهیه محلول‌ها و تنظیم pH استفاده می‌شوند. همچنین نمک‌های معدنی (NaCl، KCl)، شاخص‌های pH (فنل فتالئین، متیل اورانژ) و کاتالیزورها (پالادیم، نیکل) در سنتز و آنالیز کاربرد دارند. برخی مواد مانند آب مقطر، محیط‌های کشت و معرف‌های تشخیصی (بندیکت، لوگول) نیز در آزمایشگاه‌های زیست‌شناسی و بیوشیمی استفاده می‌شوند. انتخاب و نگهداری صحیح این مواد برای دقت و ایمنی آزمایش‌ها ضروری است.

اسیدها و بازهای پراستفاده در آزمایشگاه

اسیدها و بازهای پرکاربرد در آزمایشگاه (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی) شامل اسید هیدروکلریک (HCl) و اسید سولفوریک (H₂SO₄) برای تنظیم pH و هضم نمونه‌ها، اسید نیتریک (HNO₃) در تجزیه فلزات سنگین، و اسید استیک (CH₃COOH) در سنتزهای آلی هستند. در میان بازها، سدیم هیدروکسید (NaOH) و پتاسیم هیدروکسید (KOH) برای خنثی‌سازی اسیدها و آمونیاک (NH₃) در واکنش‌های کمپلکس‌سازی کاربرد گسترده‌ای دارند. این مواد با درجه خلوص بالا (مانند درجه تحلیلی) انتخاب می‌شوند تا از تداخل ناخالصی‌ها در نتایج جلوگیری شود، ضمن اینکه رعایت اصول ایمنی مانند استفاده از هود و لباس محافظ هنگام کار با آنها ضروری است. نگهداری صحیح این مواد در ظروف مقاوم به خوردگی و دور از عوامل محیطی مانند نور و رطوبت، از فساد و کاهش کیفیت آنها جلوگیری می‌کند.

حلال های آلی و معدنی پرکاربرد در آزمایشگاه

حلال‌های آلی و معدنی پرکاربرد در آزمایشگاه (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی) شامل متانول و اتانول برای استخراج ترکیبات آلی، استون برای شستشوی ظروف شیشه‌ای، و هگزان برای کروماتوگرافی لایه نازک (TLC) هستند. از جمله حلال‌های معدنی، آب مقطر به عنوان حلال جهانی در اکثر آزمایش‌ها و اسیدهای رقیق مانند HCl برای حل کردن نمک‌های معدنی استفاده می‌شوند. این حلال‌ها با درجه خلوص بالا (HPLC یا آزمایشگاهی) انتخاب می‌شوند تا از تداخل ناخالصی‌ها در نتایج جلوگیری شود، ضمن اینکه رعایت اصول ایمنی مانند استفاده از هود و دستکش مقاوم در برابر حلال‌ها هنگام کار با آنها ضروری است. نگهداری صحیح این حلال‌ها در ظروف تیره و دور از منابع احتراق، از تبخیر و کاهش کیفیت آنها جلوگیری می‌کند.

محیط‌ های کشت میکروبی پرکاربرد در آزمایشگاه

محیط‌های کشت میکروبی پرکاربرد در آزمایشگاه (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی) شامل انواعی مانند محیط کشت نوترینت آگار (Nutrient Agar) برای رشد عمومی باکتری‌ها، بلاد آگار (Blood Agar) جهت تشخیص باکتری‌های همولیتیک، مک کانکی آگار (MacConkey Agar) برای جداسازی باکتری‌های گرم منفی روده‌ای، و سابورو دکستروز آگار (SDA) برای کشت قارچ‌ها هستند. همچنین، محیط کشت LB (Luria-Bertani) در کشت باکتری‌های رایج آزمایشگاهی و مانیتول سالت آگار (MSA) برای تشخیص استافیلوکوک‌ها کاربرد دارند. این محیط‌ها با تأمین مواد مغذی ضروری مانند پپتون، عصاره گوشت و آگار، شرایط بهینه برای رشد و تمایز میکروارگانیسم‌ها را فراهم می‌کنند. انتخاب محیط کشت مناسب بر اساس نوع میکروب و هدف آزمایش (تشخیص، جداسازی یا شمارش) از اهمیت بالایی برخوردار است.

معرف های پرکاربرد در آزمایشگاه

معرف‌های (رآژان‌های) پرکاربرد در آزمایشگاه (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی) شامل ترکیبات شیمیایی مانند فنول فتالئین و متیل اورانژ برای سنجش pH، بندیکت و فهلینگ برای شناسایی قندهای احیاکننده، لوگول برای تشخیص نشاسته، و سودان III برای شناسایی لیپیدها هستند. همچنین نین‌هیدرین برای تشخیص اسیدهای آمینه، بیوره‌ت برای شناسایی پروتئین‌ها، و واکنش‌گرهای الایزا مانند TMB و PNPP در تست‌های ایمونولوژی کاربرد گسترده‌ای دارند. این معرف‌ها با ایجاد تغییر رنگ، رسوب یا واکنش‌های شیمیایی خاص، امکان شناسایی و اندازه‌گیری دقیق مواد را در آزمایش‌های بیوشیمیایی، میکروبیولوژی و تشخیص پزشکی فراهم می‌کنند. انتخاب معرف مناسب با توجه به حساسیت، دقت و سازگاری با روش آزمایشی از عوامل کلیدی در نتایج قابل اطمینان است.

انواع محلول‌ های آزمایشگاهی و کاربردهای تخصصی آنها

محلول‌های آزمایشگاهی به دسته‌های مختلفی تقسیم می‌شوند که هرکدام کاربردهای تخصصی منحصر‌به‌فردی دارند (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی). محلول‌های بافر مانند بافر فسفات (PBS) برای ثابت نگه داشتن pH در آزمایش‌های بیوشیمیایی و کشت سلولی استفاده می‌شوند. محلول‌های شاخص نظیر فنول فتالئین و متیل اورانژ در تیتراسیون‌های اسید و باز کاربرد دارند. محلول‌های نمکی مانند نرمال سالین (۰٫۹٪ NaCl) در شستشوی نمونه‌های بیولوژیکی و آماده‌سازی نمونه‌ها استفاده می‌شوند. محلول‌های استاندارد شامل استانداردهای کالیبراسیون برای دستگاه‌هایی مانند اسپکتروفتومتر و HPLC هستند. محلول‌های تثبیت‌کننده مانند فرمالین در نگهداری بافت‌ها و نمونه‌های پاتولوژی کاربرد دارند. محلول‌های کشت میکروبی نظیر محلول‌های مغذی برای رشد باکتری‌ها و سلول‌ها ضروری هستند. هر یک از این محلول‌ها با فرمولاسیون و غلظت دقیق، نقش حیاتی در صحت و دقت نتایج آزمایشگاهی ایفا می‌کنند.

مواد مصرفی آزمایشگاهی و نکات نگهداری آنها

مواد مصرفی آزمایشگاهی مانند پیپت‌ها، لوله‌های آزمایش، پلیت‌های کشت و ظروف شیشه‌ای از اقلام پرکاربرد در آزمایشگاه‌ها هستند که بایستی با دقت نگهداری شوند. برای حفظ کیفیت این مواد، ظروف شیشه‌ای باید عاری از ترک و خراش بوده و پس از استفاده با محلول‌های مناسب مانند آب مقطر و استون شسته شوند. پیپت‌ها و سرسمپلرها نیاز به کالیبراسیون دوره‌ای دارند و باید از ضربه و حرارت مستقیم دور نگه داشته شوند. پلیت‌های کشت میکروبی بهتر است در دمای ۴ درجه سانتی‌گراد و دور از نور نگهداری شوند. همچنین فیلترهای ممبران و سرنگی باید در بسته‌بندی اصلی خود و در محیط خشک حفظ گردند. رعایت اصول نگهداری نه تنها عمر مواد را افزایش می‌دهد، بلکه از خطاهای آزمایشگاهی نیز جلوگیری می‌کند. نکته کلیدی، برچسب‌گذاری صحیح و دورریزی اصولی مواد مصرف شده طبق دستورالعمل‌های ایمنی است.

مواد پرکاربرد در آزمایشگاه‌ های پزشکی و تشخیصی

در آزمایشگاه‌های پزشکی و تشخیصی (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی)، مواد پرکاربرد شامل آنتی‌کوآگولان‌هایی مانند EDTA و هپارین برای آزمایش‌های هماتولوژی، رنگ‌های تشخیصی مانند گیمسا و رایت برای بررسی خون، محیط‌های کشت اختصاصی مانند مک‌کانکی و بلاد آگار برای میکروب‌شناسی، و کیت‌های تشخیصی نظیر الایزا و PCR برای شناسایی بیماری‌ها هستند. همچنین معرف‌های بیوشیمیایی مانند گلوکز اکسیداز برای اندازه‌گیری قند خون و آنزیم‌های کبدی مانند ALT/AST به طور گسترده استفاده می‌شوند. نگهداری صحیح این مواد شامل رعایت زنجیره سرمایی برای کیت‌های حساس، محافظت از نور برای رنگ‌ها، و کنترل تاریخ انقضا برای تمام مواد مصرفی است که دقت نتایج مواد آزمایشگاهی را تضمین می‌کند. این مواد نقش حیاتی در تشخیص بیماری‌ها، پایش درمان و تحقیقات پزشکی ایفا می‌کنند.

کاربردهای روپوش آزمایشگاه

مقایسه مواد آزمایشگاهی و جایگزین‌ های اقتصادی

در آزمایشگاه‌ها (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی)، مواد اصلی مانند محیط‌های کشت آماده (مانند نوترینت آگار) و معرف‌های درجه HPLC اغلب گران‌قیمت هستند، اما جایگزین‌های اقتصادی مانند تهیه دستی محیط کشت با پپتون و عصاره گوشت یا استفاده از حلال‌های صنعتی با درجه خلوص پایین‌تر برای کاربردهای غیرحساس وجود دارد. هرچند این جایگزین‌ها ممکن است تا 60% هزینه‌ها را کاهش دهند، اما در آزمایش‌های حساس تشخیصی یا تحقیقاتی که به دقت بالا نیاز است، استفاده از مواد اصلی با درجه خلوص تضمین‌شده ضروری می‌باشد. برای مثال، در رنگ‌آمیزی‌های روتین میکروسکوپی می‌توان از رنگ‌های تولید داخلی به جای وارداتی استفاده کرد، اما در تکنیک‌هایی مانند PCR یا الایزا باید از کیت‌های استاندارد استفاده شود. انتخاب بین مواد اصلی و جایگزین‌ها باید بر اساس نوع آزمایش، سطح دقت مورد نیاز و بودجه آزمایشگاه انجام گیرد، به طوری که هم کیفیت نتایج حفظ شود و هم صرفه‌جویی اقتصادی امکان‌پذیر باشد.

کاربردهای مواد آزمایشگاهی

مواد آزمایشگاهی کاربردهای گسترده‌ای در حوزه‌های تحقیقاتی (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی)، تشخیصی و صنعتی دارند که شامل شناسایی و تجزیه ترکیبات شیمیایی (با استفاده از معرف‌هایی مانند فنول فتالئین و بندیکت)، کشت و شناسایی میکروارگانیسم‌ها (در محیط‌های کشتی مانند بلاد آگار و مک‌کانکی)، اندازه‌گیری پارامترهای بیوشیمیایی (با کیت‌های الایزا و PCR)، و انجام واکنش‌های سنتزی (با کاتالیزورها و حلال‌های آلی) می‌شود. این مواد در آزمایشگاه‌های پزشکی برای تشخیص بیماری‌ها (با آنتی‌کوآگولان‌ها و رنگ‌های هماتولوژی)، در صنایع غذایی برای کنترل کیفیت (با معرف‌های سنجش pH و آلاینده‌ها)، و در تحقیقات دانشگاهی برای مطالعات سلولی و مولکولی (با بافرها و آنزیم‌های اختصاصی) به کار می‌روند. استاندارد بودن مواد، روش‌های نگهداری مناسب (مانند حفظ زنجیره سرمایی برای آنزیم‌ها و دوری از نور برای رنگ‌ها) و انتخاب درست بر اساس حساسیت آزمایش (استفاده از مواد درجه HPLC برای کروماتوگرافی یا مواد درجه صنعتی برای کاربردهای عمومی) از عوامل کلیدی در موفقیت فرآیندهای آزمایشگاهی محسوب می‌شوند.

مزایای استفاده از مواد آزیشگاهی با کیفیت

استفاده از مواد آزمایشگاهی باکیفیت مزایای متعددی دارد که مهم‌ترین آنها شامل افزایش دقت و صحت نتایج آزمایش‌ها (مواد پرکاربرد آزمایشگاهی)، کاهش خطاهای تشخیصی، و تضمین تکرارپذیری پژوهش‌ها می‌شود. مواد مرغوب مانند معرف‌های درجه HPLC، محیط‌های کشت استاندارد، و کیت‌های تشخیصی معتبر، نه تنها از آلودگی‌های ناخواسته جلوگیری می‌کنند، بلکه با کاهش نیاز به تکرار آزمایش‌ها در بلندمدت مقرون‌به‌صرفه‌تر هستند. این مواد با حفظ پایداری شیمیایی و میکروبیولوژیکی، عمر مفید بیشتری داشته و با ارائه نتایج قابل اعتماد، نقش کلیدی در تشخیص‌های پزشکی، کنترل کیفیت صنعتی و تحقیقات علمی پیشرفته ایفا می‌کنند. علاوه بر این، رعایت استانداردهای بین‌المللی در تولید این مواد، ایمنی پرسنل آزمایشگاه و محیط زیست را نیز تضمین می‌نماید.

بهینه‌ سازی مصرف مواد در آزمایشگاه

بهینه‌سازی مصرف مواد در آزمایشگاه با مدیریت صحیح منابع، کاهش هزینه‌ها و افزایش بهره‌وری همراه است. با برنامه‌ریزی دقیق برای خرید مواد براساس نیاز واقعی، استفاده از روش‌های جایگزین کم‌مصرف (مانند میکروآزمایش‌ها)، و بهینه‌سازی حجم مواد مصرفی در پروتکل‌ها می‌توان تا ۳۰٪ در مصرف صرفه‌جویی کرد. اجرای سیستم‌های نظارتی برای کنترل تاریخ انقضا، نگهداری اصولی مواد حساس (مانند آنزیم‌ها و آنتی‌بادی‌ها) در دمای مناسب، و بازیافت یا استفاده مجدد از برخی مواد مانند حلال‌ها در فرآیندهای غیرحساس، از دیگر راهکارهای مؤثر محسوب می‌شوند. آموزش پرسنل برای استفاده صحیح از تجهیزات و مواد نیز نقش کلیدی در کاهش ضایعات و افزایش عمر مفید مواد دارد. این اقدامات نه تنها هزینه‌های عملیاتی را کاهش می‌دهد، بلکه با کمینه کردن پسماندهای آزمایشگاهی، گامی مهم در جهت توسعه پایدار و حفاظت از محیط زیست برداشته می‌شود.

نکات ایمنی در کار با مواد آزمایشگاهی

رعایت نکات ایمنی هنگام کار با مواد آزمایشگاهی برای پیشگیری از حوادث و حفظ سلامت پرسنل ضروری است. همیشه از لباس محافظ (مانند روپوش آزمایشگاهی، دستکش مقاوم به مواد شیمیایی، عینک ایمنی و ماسک) استفاده کنید و از تماس مستقیم پوست با مواد شیمیایی خودداری نمایید. مواد سمی، خورنده و قابل اشتعال (مانند اسیدهای غلیظ، بازهای قوی و حلال‌های آلی) باید در هود شیمیایی استفاده شوند و از استنشاق بخارات آنها جلوگیری شود. برچسب‌گذاری صحیح ظروف شامل نام ماده، تاریخ تهیه و خطرات احتمالی الزامی است. در صورت ریختن مواد شیمیایی، بلافاصله با مواد خنثی‌کننده مناسب (مانند جاذب‌های شیمیایی) اقدام به پاکسازی کنید. آشنایی با برگه اطلاعات ایمنی (MSDS) هر ماده و دسترسی به کیت کمک‌های اولیه و کپسول آتش‌نشانی در آزمایشگاه ضروری است. همچنین ذخیره‌سازی مناسب مواد (دور از نور، گرما و رطوبت) و دفع اصولی پسماندها طبق دستورالعمل‌های ایمنی از آلودگی محیط زیست جلوگیری می‌کند.

مواد پرکاربرد آزمایشگاهی

خطرات کار با اسیدها و بازهای قوی

کار با اسیدها و بازهای قوی مانند اسید سولفوریک (H₂SO₄)، اسید نیتریک (HNO₃) و سدیم هیدروکسید (NaOH) خطرات جدی دارد و نیاز به رعایت اصول ایمنی دقیق دارد. این مواد می‌توانند باعث سوختگی‌های شدید پوستی و چشمی، آسیب به دستگاه تنفسی در اثر استنشاق بخارات سمی، و خوردگی تجهیزات آزمایشگاهی شوند. واکنش‌های ناخواسته مانند انفجار یا پاشش در صورت مخلوط کردن اسیدهای غلیظ با آب یا بازها ممکن است رخ دهد. تماس این مواد با فلزات (مانند آلومینیوم) نیز گازهای خطرناک تولید می‌کند. برای کاهش خطرات، همیشه از هود شیمیایی، دستکش‌های مقاوم (مانند نیتریل یا نئوپرن)، عینک محافظ و روپوش آزمایشگاهی استفاده کنید. در صورت تماس تصادفی، شستشوی فوری با آب فراوان (حداقل ۱۵ دقیقه) و مراجعه به پزشک ضروری است. همچنین، ذخیره‌سازی جداگانه اسیدها و بازها در ظروف مقاوم و در محیط خنک و تهویه‌دار از بروز حوادث جلوگیری می‌کند.

استانداردهای نگهداری مواد قابل اشتعال در آزمایشگاه

نگهداری مواد قابل اشتعال در آزمایشگاه نیازمند رعایت استانداردهای سختگیرانه ایمنی است. این مواد شامل حلال‌های آلی (مانند اتانول، استون و اتر) باید در ظروف ضد انفجار و به دور از منابع حرارت، جرقه و تابش مستقیم آفتاب ذخیره شوند. مخازن نگهداری باید در محفظه‌های مخصوص و مجهز به سیستم تهویه مناسب (مانند کابینت‌های فلزی ضد حریق با تهویه) قرار گیرند. حجم ذخیره‌سازی نباید از حد مجاز (معمولاً کمتر از ۵۰ لیتر در فضای آزمایشگاه) تجاوز کند و برچسب‌گذاری واضح همراه با نمادهای خطر الزامی است. همچنین لازم است کپسول‌های آتش‌نشانی (از نوع CO۲ یا پودری) در دسترس بوده و پرسنل با روش‌های مقابله با آتش‌سوزی آشنا باشند. مواد قابل اشتعال باید جدا از اکسیدان‌ها (مانند پراکسیدها) نگهداری شوند تا از خطر واکنش‌های شیمیایی ناخواسته جلوگیری شود.

نحوه دفع مواد شیمیایی خطرناک

دفع ایمن مواد شیمیایی خطرناک در آزمایشگاه مستلزم رعایت پروتکل‌های دقیق برای جلوگیری از آلودگی محیط زیست و تهدید سلامت انسان‌هاست. این مواد شامل پس‌ماندهای اسیدی، بازی، حلال‌های آلی سمی، فلزات سنگین و ترکیبات رادیواکتیو باید بر اساس ماهیت شیمیایی و سطح خطرشان تفکیک شده و در ظروف مقاوم و درب‌دار با برچسب‌های هشداردهنده جمع‌آوری شوند. خنثی‌سازی اسیدها و بازها قبل از دفع، تبدیل ترکیبات سمی به فرم‌های کم‌خطرتر و استفاده از شرکت‌های مجاز بازیافت و دفع پسماندهای شیمیایی از اقدامات ضروری است. هرگز نباید این مواد را در سینک آزمایشگاه یا سیستم فاضلاب عمومی رها کرد. ثبت دقیق نوع، مقدار و روش دفع هر ماده در فرم‌های مخصوص و آموزش پرسنل درباره دستورالعمل‌های مدیریت پسماند از الزامات یک سیستم دفع ایمن محسوب می‌شود. رعایت این اصول نه تنها از جریمه‌های قانونی جلوگیری می‌کند، بلکه مسئولیت اجتماعی هر آزمایشگاه در قبال محیط زیست است.

خرید و قیمت مواد پرکاربرد آزمایشگاهی

خرید مواد پرکاربرد آزمایشگاهی مانند محیط‌های کشت، معرف‌های شیمیایی و کیت‌های تشخیصی نیازمند توجه به فاکتورهای کلیدی از جمله کیفیت (درجه خلوص HPLC/تحلیلی)، قیمت، برند معتبر (مانند Merck، Sigma-Aldrich) و شرایط نگهداری است. قیمت این مواد بر اساس نوع کاربرد (تحقیقاتی، تشخیصی یا صنعتی)، حجم خرید (عمده معمولاً مقرون‌به‌صرفه‌تر) و کشور سازنده متغیر است. برای خرید بهینه، مقایسه قیمت از تامین‌کنندگان معتبر داخلی و خارجی، بررسی گواهی‌های کیفیت (COA) و توجه به هزینه‌های جانبی مانند حمل‌ونقل و گمرک ضروری است. برخی آزمایشگاه‌ها برای کاهش هزینه، مواد با حجم بالا یا جایگزین‌های داخلی با کیفیت قابل قبول را انتخاب می‌کنند. توصیه می‌شود قبل از خرید، از مشاوره تخصصی شرکت‌های تامین کننده مواد آزمایشگاهی استفاده شود تا هماهنگی کامل بین نیاز آزمایشگاه و محصول تأمین شده وجود داشته باشد.

نتیجه گیری

مواد پرکاربرد آزمایشگاهی مانند اسیدها، بازها، محیط‌های کشت، معرف‌ها و کیت‌های تشخیصی، نقش حیاتی در انجام دقیق و قابل اعتماد آزمایش‌های تحقیقاتی، تشخیصی و صنعتی ایفا می‌کنند. انتخاب مواد با کیفیت بالا (درجه تحلیلی یا HPLC)، رعایت اصول ایمنی در کار با مواد خطرناک، نگهداری صحیح و دفع اصولی پسماندها، از عوامل کلیدی در موفقیت فرآیندهای آزمایشگاهی محسوب می‌شوند. بهینه‌سازی مصرف و خرید هوشمندانه این مواد با توجه به نیاز واقعی آزمایشگاه، نه تنها هزینه‌ها را کاهش می‌دهد، بلکه تضمین‌کننده نتایج دقیق و تکرارپذیر است. در نهایت، آگاهی از آخرین استانداردها و فناوری‌های روز در زمینه مواد آزمایشگاهی، به ارتقای کیفیت پژوهش‌ها و خدمات تشخیصی کمک شایانی می‌کند.

بازگشت به لیست

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *